#3510986 COGEPE FIOCRUZ - 2024 - Tecnologista em Saúde Pública (FIOCRUZ)/Controle Sanitário e Genético de Animais de Laboratório

Sobre o sequenciamento automático de Sanger, a alternativa que apresenta a ordem correta das etapas da reação é:

desnaturação de um fragmento de DNA de fita dupla; ligação de um par de iniciadores específicos; polimerização com incorporação aleatória de desoxirribonucleotídeos (dNTPs); eletroforese em gel de agarose a 2%; impregnação por corante intercalante de DNA (brometo de etídio); revelação por exposição à luz ultravioleta (UV).
desnaturação de um fragmento de DNA de fita dupla; ligação de um iniciador específico por reação; polimerização com incorporação aleatória de didesoxinucleotídeos (ddNTPs) marcados com substâncias fluorescentes e de desoxirribonucleotídeos (dNTPs); interrupção da polimerização nos sítios de ligação dos ddNTPs na sequência; eletroforese capilar dos fragmentos de diferentes tamanhos; leitura em um detector de fluorescência; armazenamento das informações em computador.
desnaturação de um fragmento de RNA; adição da enzima transcriptase reversa (TR) e um iniciador específico por reação; polimerização com incorporação aleatória de desoxirribonucleotídeos (dNTPs); interrupção da polimerização nos sítios de ligação dos dNTPs na sequência; eletroforese capilar dos fragmentos de diferentes tamanhos; leitura em um detector de fluorescência; armazenamento das informações em computador.
desnaturação de um fragmento de DNA de fita dupla; ligação de um par de iniciadores específicos e uma sonda de hidrólise fluorescente por reação; polimerização com incorporação aleatória de didesoxinucleotídeos (ddNTPs) marcados com substâncias fluorescentes; interrupção da polimerização nos sítios de ligação dos ddNTPs na sequência; eletroforese capilar dos fragmentos de diferentes tamanhos; leitura em um detector de fluorescência; armazenamento das informações em computador.
desnaturação de um fragmento de DNA de fita dupla; ligação de um par de iniciadores específicos por reação; polimerização com incorporação aleatória de didesoxinucleotídeos (ddNTPs) marcados com substâncias fluorescentes; interrupção da polimerização nos sítios de ligação dos ddNTPs na sequência; eletroforese capilar dos fragmentos de diferentes tamanhos; leitura em um detector de fluorescência; armazenamento das informações em computador.